供應商 | 上海聯(lián)祖生物科技有限公司 店鋪 |
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認證 | |
報價(jià) | 人民幣 4490.00元每盒 |
關(guān)鍵詞 | 卡氏枝孢霉,探針?lè )晒舛縋CR |
所在地 | 上海市嘉定區嘉羅公路1661 |
2年
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng):卡氏枝孢霉探針?lè )晒舛縋CR試劑盒
英文名稱(chēng):Cladosporium carrionii
產(chǎn)品貨號:LZ-P3396
規格:50T
分類(lèi):PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
有效期:一年
實(shí)驗步驟:
一.樣品制備
1.PCR擴增并檢測。根據不同的引物挑選適合的退火溫度進(jìn)行PCR擴增。擴增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測,上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。上海
2.PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液(變性緩沖液,同《分子克隆》中的測序緩沖液),然后在緩沖液中央加入PCR擴增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗,擴增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul,效果很好加0.5ul,如果不太好就適當增加1.5、2或3不等,同時(shí)加大上樣緩沖液的量,比如加3ul的PCR產(chǎn)物,緩沖液加到8ul變性效果更好。
3.PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進(jìn)行離心,使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘,立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min,以免變性的產(chǎn)物復性。
如何進(jìn)行 PCR 實(shí)驗?
一、準備實(shí)驗材料(1)DNA模板:包含你想要復制的DNA區域。(2)引物:短的單鏈DNA片段,用于指導DNA合成的起始位置。(3)DNA聚合酶:一種酶,用于合成DNA。(4)四種脫氧核苷酸(dNTPs):DNA的構建塊。(5)緩沖液:提供適宜的反應環(huán)境。(6)鎂離子或其它必需的離子:通常作為DNA聚合酶的輔助因子。 二、設定反應混合物將所有材料混合在微量離心管中?;旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序(1)將混合物放入PCR機(熱循環(huán)儀)中,并設定程序。PCR程序通常包括以下階段:(2)初次變性:加熱至94-98°C,持續幾分鐘,使DNA雙鏈解開(kāi)成單鏈。(3)循環(huán)步驟(通常進(jìn)行30-40次循環(huán)):(4)變性階段:加熱至94-98°C,持續20-30秒,使DNA雙鏈解開(kāi)。(5)退火階段:降溫至50-65°C,持續20-40秒,允許引物與模板DNA結合。(6)延伸階段:加熱至72°C,持續1分鐘每1千個(gè)堿基,以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。(7)后延伸:在72°C下持續5-10分鐘,確保所有可用的DNA模板都被復制。(8)保持階段:將溫度降至4-15°C,直到用戶(hù)準備取出樣品。
PCR實(shí)驗的基本步驟:
DNA聚合酶是實(shí)驗室中常用的生物學(xué)酶之一,在PCR實(shí)驗中具有重要的作用。實(shí)驗室常用的DNA聚合酶,包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一卡氏枝孢霉、Taq聚合酶:
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶,在分子生物學(xué)研究中得到廣泛應用。Taq聚合酶具有熱穩定性,可以在高溫條件下保持活性,這是由于其來(lái)源于熱液生物,能夠存活和正?;顒?dòng)于高溫環(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈式反應(PCR)中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈,因此在PCR中用于擴增目標DNA片段。然而,Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性,導致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現額外的腺嘌呤堿基。因此,在某些應用中,需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、探針?lè )晒舛縋CRPfu聚合酶:
PCR法Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比,Pfu聚合酶具有更高的熱穩定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應中表現出色,其高度穩定的酶活性能夠確保PCR反應的可靠性和準確性。此外,Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性,可以修復并糾正PCR反應中的腺嘌呤堿基誤配,有效防止誤差累積。因此,Pfu聚合酶適用于需要高度準確的PCR擴增和DNA測序。
三、Tth聚合酶:
Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同,Tth聚合酶具有熱活性反轉轉錄酶活性,可以將RNA模板合成相應的DNA鏈。因此,Tth聚合酶在逆轉錄PCR(RT-PCR)中得到廣泛應用,用于將RNA轉錄成DNA,并通過(guò)增加熱活性酶來(lái)實(shí)現PCR擴增。此外,Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性,可用于修復和校正PCR產(chǎn)物的末端。
人骨保護素(OPG)ELISA
小鼠白介素35(IL-35)試劑盒 Mouse Ierleukin 35,IL-35 ELISA Kit
鋅指蛋白RIZ(PRDM2)PCR檢測試劑盒 , PRDM2 ELISA Kit
MouseHya]uronatebindingprotein,HABPPCR檢測試劑盒小鼠透明質(zhì)酸結合蛋白(HABP)PCR檢測試劑盒
ELISAKitPGE1兔子前列腺素E1規格:48T/96T
Chickengrowthhormone,GHELISAKit雞生長(cháng)激素(GH)PCR檢測試劑盒
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SEPT10 英文名稱(chēng): 細胞分化蛋白SEPT10抗體 0.2ml
Phospho-HER4 (Tyr1258) 英文名稱(chēng): 0酸化HER4抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-FXYD1 (Ser83) 0酸化0酸神經(jīng)膜抗體 規格 0.1ml
CK7(Cytokeratin 7)human 細胞角蛋白7抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
卡氏枝孢霉探針?lè )晒舛縋CR試劑盒NN-T4(Human Neonatal Thyroxine) ELISA Kit 人新生甲狀腺素Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關(guān)蛋白酪酸激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF4A 沉默驅動(dòng)蛋白KIF4A抗體 規格 0.2ml
ASD ELISA Kit 大鼠雄 96T
PHLP 英文名稱(chēng): 抑制基因PHLPP抗體 0.2ml
phospho-c-Abl(Tyr283) 英文名稱(chēng): 0酸化非受體酪酸激酶c-Abl抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相關(guān)蛋白酪酸激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
甲基檸檬酸合酶(MCS)試劑盒可見(jiàn)分光光度法
780元
產(chǎn)品名:甲基檸檬酸合酶,可見(jiàn)分光光度法,試劑盒
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780元
產(chǎn)品名:乙酰輔酶A試劑盒,紫外分光光度法,試劑盒
脂肪酸合成酶(FAS)試劑盒紫外分光光度法
780元
產(chǎn)品名:脂肪酸合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
線(xiàn)粒體檸檬酸(MCA)含量試劑盒紫外分光光度法
975元
產(chǎn)品名:線(xiàn)粒體檸檬酸,紫外分光光度法,試劑盒
?;D移酶(AAT)試劑盒可見(jiàn)分光光度法
1300元
產(chǎn)品名:?;D移酶,可見(jiàn)分光光度法,試劑盒
可溶性淀粉合成酶(SSS)試劑盒紫外分光光度法
1300元
產(chǎn)品名:可溶性淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
結合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)試劑盒紫外分光光度法
1300元
產(chǎn)品名:結合態(tài)淀粉合成酶,紫外分光光度法,試劑盒
NO含量試劑盒微量法
253.5元
產(chǎn)品名:NO含量,微量法,試劑盒